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支原体污染检测和清除

2016/7/5 11:11:56
支原体污染检测和清除

支原体污染检测和清除

详细介绍

下载:支原体污染PCR检测试剂盒说明书

下载:支原体清除剂说明书

下载:支原体清除实例

支原体污染的检测和清除

Detection and Elimination of Mycoplasma Contamination


支原体污染是基础研究和工业生产中一个很常见的问题,可能有高达87%的细胞系发生过支原体污染。支原体在光学显微镜下不可见,对培养基的需求有限,一般不会引起培养物混浊,因此细胞被支原体污染一般难以察觉。支原体污染能消耗营养物,促进代谢积累,导致pH改变,诱导或抑制细胞因子表达,并改变培养细胞的代谢、增殖特征及形态。由于支原体污染能影响几乎每一个细胞参数,所以很多研究都强调常规检测正在培养的细胞,以确保观察到的结果不被支原体污染所损害。

细胞的支原体污染,可使用我公司生产的支原体污染PCR检测试剂盒进行检测,并使用支原体清除剂去除已确认的支原体污染。


支原体污染PCR检测试剂盒

PCR Detection Kit for Mycoplasma Contamination


货号:Myco-P-20                   规格:20个反应

货号:Myco-P-50                   规格:50个反应

货号:Myco-P-100                 规格:100个反应

保存条件:保存于-20℃,避免反复冻融。没有反复冻融的情况下,保质期一年。

     支原体污染PCR检测试剂盒,可用于检测细胞培养中的支原体(Mycoplasma)污染,也可作为支原体通用PCR检测试剂盒使用。支原体是一种没有细胞壁的微生物,属于柔膜菌纲(Mollicutes),常被用作柔膜菌纲的统称。本试剂盒可检测属于柔膜菌纲的支原体、脲原体、无胆甾支原体、螺原体、虫原体、中间原体等超过一百种,与柔膜菌纲以外的其他微生物没有特异性反应。

     使用支原体污染PCR检测试剂盒,能在23小时内获得可靠的结果,是一种灵敏度高、特异性强、快速的检测支原体污染的方法,具有以下特点:  特异性引物是针对高度保守的支原体16S rRNA序列设计的,可用于检测非常广泛的支原体种类,不受真核细胞或细菌DNA干扰。经本试剂盒测试的支原体菌株涵盖了所有常见的支原体污染种类; 灵敏度极高,最低仅需10个拷贝的支原体基因组即可使检测呈阳性; 阳性对照所用引物与支原体检测相同,可帮助判断假阴性现象,避免假阴性导致的误判;  包含PCR反应所需的所有成分,只需进行一次PCR反应,使用方便。

对于确定有支原体污染的细胞,可以使用支原体清除剂(http://www.biothrive.cn/Product/2756935939.html)进行清除。


 

支原体清除剂

Mycoplasma Elimination Reagent


货号:Myco-E-h                   规格:0.5 ml

货号:Myco-E-1                   规格:1 ml

货号:Myco-E-5                   规格:5 ml

保存条件:室温下一周,4℃一个月,-20℃两年。如需保存在-20℃,请分装以避免反复冻融。注意避光保存。如发现有结晶出现,涡旋振荡使其溶解即可。



支原体污染是基础研究和工业生产中一个很常见的问题,可能有高达87%的细胞系发生过支原体污染。支原体是一种直径约为0.2-0.3 μm、无细胞壁的原核生物,具有变形能力,可透过常见过滤膜(0.22-0.45 μm),常规的无菌过滤方法不能将其去除,细胞培养常用的青霉素和链霉素也不能清除培养物中的支原体。支原体污染能改变细胞的DNARNA和蛋白质的合成,引起染色体异常,尤其是会改变宿主细胞表面膜蛋白抗原性。

由于支原体污染能影响几乎每一个细胞参数,所以很多研究都强调常规筛选正在培养的细胞,以确保观察到的结果不被支原体污染所损害。

支原体清除剂属于新一代杀菌抗生素,可用于细胞培养中支原体污染的清除,同时能以较低的浓度发挥广谱的抗革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌的作用,譬如能作用于耐青霉素与链霉素的细菌。已证实支原体清除剂对真核细胞无毒性。

本产品包括两种杀菌成份,即大环内类和喹诺酮类物质。大环内酯能结合细菌50S核糖体亚基,从而抑制蛋白质合成,喹诺酮能抑制细菌DNA消旋酶的活性,因此可以在细菌蛋白质合成及DNA复制两个层面上抑制细菌生长,明显增强除菌效果。这两个靶点在真核细胞内都不存在,所以本产品对真核细胞无毒。将本产品作用浓度加高5倍,对细胞没有明显的影响。在更高的浓度下,细胞的生长速率会出现下降,这是由于线粒体呼吸受到抑制的缘故,去除本产品后细胞生长速度即可恢复正常。

由于优越的双重除菌机制,本产品可避免抗性支原体的产生。喹诺酮可以自由的穿透哺乳动物细胞,可以同时除去游离形式的及真核细胞内部的支原体,这个特点保证了经过处理的细胞不会被支原体感染细胞中释放出的支原体反复感染。因此可以避免除菌后细胞内支原体的反复感染。

在检测到支原体已经除尽后再停止加药,可配合本公司的支原体污染PCR检测试剂盒(http://www.biothrive.cn/Product/5102865729.html )使用。

本产品用于清除细胞培养中出现的支原体污染,不用于人体。

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