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两种推定肽酶基因破坏对牛支原体胞外蛋白水解及代谢活性的影响机制研究在兽医微生物学领域，牛支原体（Mycoplasma bovis）作为一种缺乏细胞壁的微小病原体，常引起牛群肺炎、乳腺炎和关节炎等严重疾病，给全球畜牧业造成重大经济损失。由于基因组的极端简化，这类病原体丧失了多数合成代谢途径，高度依赖宿主提供营养。在这一进化背景下，蛋白水解酶系统成为牛支原体获取氨基酸和调控代谢的关键武器。然而，当前对牛支原体蛋白水解酶的具体功能认知仍存在大量空白，特别是两个推定肽酶基因MBOVPG45_0176和MBOVPG45_0685在病原体生存和致病过程中的作用机制尚未明确。 为破解这一科学难题，研究团队通过精细的实验设计展开系统性探索。首先利用生物信息学工具预测基因功能，接着通过转座子插入技术构建基因缺陷株（ΔMBOVPG45_0176和ΔMBOVPG45_0685），并采用酶谱法检测菌株对酪蛋白、明胶和胶原的蛋白水解活性。同时运用气相色谱-质谱联用技术（GC-MS）进行代谢组学分析，比较突变株与野生株PG45的代谢谱差异。此外，研究还尝试通过原核表达系统获得重组蛋白，以直接验证酶的催化功能。 |
