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新型基因筛选技术在宿主体内直接杀死寄生虫

慕尼黑大学(LMU)和格拉斯哥大学的科学家说,他们已经开发出一种新的基因筛选技术,可以阻止弓形虫的蛋白质调节,并导致它在宿主细胞内死亡。

这一发现发表在《Nature Microbiology》杂志上的一篇论文中,题为“在刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)中进行的splitCas9表型筛选确定了参与宿主细胞进出和入侵的蛋白质。”

研究人员写道:“像刚地弓形虫这样的复杂尖端寄生虫具有特定的适应能力,能够入侵宿主细胞并离开宿主细胞。由于模式生物和复杂寄生虫之间的系统发育距离,比较基因组学推断基因功能的能力有限。此外,尽管基于CRISPR/Cas9的筛选已经分配了一些弓形虫基因的角色,编码蛋白的功能已经证明很难分配。为了克服这个问题,我们在刚地弓形虫中设计了一个条件Cas9系统,可以进行表型筛选。利用F-肌动蛋白动力学和顶质体分离的指示株,我们筛选了320个基因,以识别那些在无性生命周期中定义步骤所需的基因。”

直到现在,人们还不知道是哪些基因编码了控制宿主细胞出口的蛋白质。为了识别它们,由伦敦大学实验寄生虫学团队与格拉斯哥大学的同事合作开发了一种新的基因筛选技术,并研究了320个寄生虫特异性基因库。研究人员发现了两个基因,没有它们细胞就不可能排出体外。

靶向破坏这些基因导致了出口的封锁,从而导致宿主细胞内下一代寄生虫的死亡。

“我们认为类似的过程控制了疟疾病原体的传播,”LMU寄生虫学家Elena Jimenez-Ruiz博士解释说。“下一步,我们将研究这些蛋白质在疟疾病原体中有什么功能,以及是否有开发新药的可能起点。”


A splitCas9 phenotypic screen in Toxoplasma gondii identifies proteins involved in host cell egress and invasion


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