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【包邮】探针法牛支原体实时定量PCR试剂盒

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商品参数

探针法牛支原体实时定量PCR试剂盒

Probe-quantitative Real-time PCR Kit for Mycoplasma Bovis


货号规格
Mqt-bov-2020个反应
Mqt-bov-5050个反应
Mqt-bov-100100个反应

储存:-20度,避光保存,有效期一年。避免反复冻融。

 

试剂盒特点:

1, 特异性检测牛支原体,与其他生物无交叉反应。

2, 灵敏度高,最低检测极限相当于反应液中约含1个CFU。

3, 使用的DNA聚合酶具有抗抑制能力强和热稳定性好的特点;采用热启动方式,可抑制非特异性扩增,降低背景荧光。

4, 带有阳性对照样品(组分C),可用于检验试剂盒有效性。

5, 带有UDG酶和dUTP,可降低残留DNA的污染。


商品说明

牛支原体(Mycoplasma Bovis)是最重要的致病性牛寄生支原体,呈全球流行趋势,可引起肺炎、关节炎、乳腺炎、中耳炎、结膜炎、生殖紊乱和流产等多种疾病,发病率达到60%-100%,病死率不高,但有时会造成很大的经济损失。在健康或患病的牛身上均可发现牛支原体,其疾病表现和对治疗和疫苗的反应常发生变化,诊断和控制较为困难,因此其流行程度常被低估。

牛支原体的检测方法包括:体外培养法,血清学方法,和遗传学方法。牛支原体的体外培养条件较为苛刻,用时较长,有时甚至要两周时间,并且需要特定的方法来进行鉴定,容易受到其他呼吸道病原体的干扰。血清学方法则必须在感染一段时间之后才能检测,存在检测时间的延迟,此外,实验室菌株和野外分离获得的菌株存在抗原和遗传学上的变异,对检测形成了干扰。因此,高灵敏度和高特异性的PCR法是更好的选择,其检测时间短,仅需几个小时即可获得结果。定量PCR法与普通PCR法相比,不仅可以精确定量,而且操作更为方便,更少受环境污染的影响。

由于受到无乳支原体及其他一些近亲支原体的干扰,基于16S rRNA基因的PCR方法往往无法准确鉴别牛支原体。基于DNA复制修复基因uvrC的PCR方法可以对这些支原体进行特异性区分,而且该基因十分稳定,很少发生变异,因此本试剂盒选择uvrC基因作为靶点对牛支原体进行PCR鉴定,经BLAST验证,具有非常好的特异性,与其他生物的基因组无交叉反应。通过检测10种近亲支原体和21种常见细菌,以及19个健康牛肺组织,未见假阳性结果,可见本试剂盒对牛支原体具有特异性。对385个组织样品的检测表明,本试剂盒与培养法检测结果完全一致。

本试剂盒包含热启动DNA聚合酶、dNTP(以dUTP代替dTTP)、引物、探针、阳性对照品、ROX染料,和用以防止残余DNA污染的UDG(Uracil- DNA Glycosylase,尿嘧啶-DNA-糖基酶),用户只需准备好DNA样品即可使用。

本试剂盒采用的DNA聚合酶源自极端嗜热菌(Thermus thermophilus),经改造后较普通的Taq酶具有更强的抗抑制能力和热稳定性。通过结合特异性单克隆抗体,在室温下DNA聚合酶活性被抑制。在PCR循环的热变性阶段,抗体受热被去除,此时DNA聚合酶活性恢复,因此获得“热启动”功能。热启动可减少残余DNA的污染,提高PCR扩增效率、灵敏度和目的片段产量。


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