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【包邮】探针法Candidatus Mycoplasma haemobos实时定量PCR试剂盒

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商品参数

探针法Candidatus Mycoplasma haemobos实时定量PCR试剂盒

Probe-quantitative Real-time PCR Kit for Candidatus Mycoplasma haemobos


货号规格
Mqt-hbo-2020个反应
Mqt-hbo-5050个反应
Mqt-hbo-100100个反应

储存:-20度,避光保存,有效期一年。避免反复冻融。

 

试剂盒特点:

1, 本试剂盒可以特异性检测Candidatus Mycoplasma haemobos,不受其他基因组干扰。

2, 本试剂盒灵敏度高,反应液中仅1个基因组时检出率为69%。线性范围跨越8个数量级。

3, 本试剂盒使用的DNA聚合酶具有抗抑制能力强和热稳定性好的特点;采用热启动方式,可抑制非特异性扩增,降低背景荧光。

4, 本试剂盒带有阳性对照样品(组分C),可用于检验试剂盒有效性。

5, 带有UDG酶和dUTP,可降低残留DNA的污染。


商品说明

嗜血支原体(Hemotropic Mycoplasma,或hemoplasma)是一类寄生于红细胞表面的细菌,无细胞壁,可以感染很多哺乳动物,包括猫、犬、猪、牛、羊等,也包括人类。嗜血支原体曾被命名为血巴通氏体(Hemobartonella)和附红细胞体(Eperythrozoon),根据16S rRNA基因序列分析,被重新归类为支原体。在牛体内已发现的嗜血支原体有两种:维容氏支原体(Mycoplasma wenyonii)和Candidatus Mycoplasma haemobos。

Candidatus Mycoplasma haemobos发现较晚,直至本世纪才有报导,分布较为广泛,在中国、日本、瑞士、德国和巴西等都有发现,临床症状尚不清楚。其16S rRNA基因较维容氏支原体短,相似度仅81.2%,与猫血支原体有95%的相似度,因而在分类上与猫血支原体更为接近。

Candidatus Mycoplasma haemobos尚无合适的体外培养方法,因此难以开发蛋白类检测方法。检测方法一般采用吉姆萨染色的血涂片法。血涂片法的检测灵敏度和特异性均比较差,容易受到人工制片方法和血液里其他成分的干扰,且支原体易从红细胞表面脱落,造成漏检。而PCR法在灵敏度上则有明显的优势,且可以区分支原体种类。定量PCR法与普通PCR法相比,不仅可以精确定量,而且操作更为方便,更少受环境污染的影响。

本试剂盒基于16S rRNA基因的保守区域,设计特异性引物和探针,可以准确识别Candidatus Mycoplasma haemobos,与其他生物基因组无交叉反应。经检测,本试剂盒与维容氏支原体、猫和犬的3种嗜血支原体、及4种非嗜血支原体均无交叉反应。试剂盒以牛线粒体细胞色素基因作为内参,可以排除引起假阴性的PCR抑制剂和DNA提取失败。

本试剂盒包含热启动DNA聚合酶、dNTP(以dUTP代替dTTP)、引物、探针、阳性对照品、ROX染料,和用以防止残余DNA污染的UDG(Uracil- DNA Glycosylase,尿嘧啶-DNA-糖基酶),用户只需准备好DNA样品即可使用。

本试剂盒采用的DNA聚合酶源自极端嗜热菌(Thermus thermophilus),经改造后较普通的Taq酶具有更强的抗抑制能力和热稳定性。通过结合特异性单克隆抗体,在室温下DNA聚合酶活性被抑制。在PCR循环的热变性阶段,抗体受热被去除,此时DNA聚合酶活性恢复,因此获得“热启动”功能。热启动可减少残余DNA的污染,提高PCR扩增效率、灵敏度和目的片段产量。


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