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【包邮】探针法肺炎支原体实时定量PCR试剂盒

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商品参数

探针法肺炎支原体实时定量PCR试剂盒

Probe-quantitative Real-time PCR Kit for Mycoplasma pneumoniae


货号规格
Mqt-pne-2020个反应
Mqt-pne-5050个反应
Mqt-pne-100100个反应

储存:-20度,避光保存,有效期一年。避免反复冻融。

 

试剂盒特点:

1, 特异性检测肺炎支原体,与其他生物基因组没有交叉反应。

2, 灵敏度高,最低检测极限低于每反应10个基因组。

3, 使用的DNA聚合酶具有抗抑制能力强和热稳定性好的特点;采用热启动方式,可抑制非特异性扩增,降低背景荧光。

4, 带有阳性对照样品(组分C),可用于检验试剂盒有效性。

5, 带有dUTP和UDG酶,可降低残留DNA的污染。


商品说明

肺炎支原体(Mycoplasma Pneumoniae)属于最小的自我复制型生物之一,是导致支原体肺炎的人类病原体。其细胞呈细长形状,长约1-2μm,宽约0.1-0.2μm,光学显微镜下无法检测;其菌落的长度通常小于100μm,需要立体显微镜来观察。肺炎支原体寄生于人类的呼吸道上皮,通过附着细胞器粘附于呼吸上皮细胞,然后与宿主细胞融合并进入细胞内,逃避宿主免疫系统的检测,并调节细胞膜的组成以模拟宿主细胞膜。因此肺炎支原体易于产生慢性或潜伏性感染,而且因其细胞膜组成与人细胞相似,可能导致几种器官和组织中的自身免疫反应。

肺炎支原体分布遍及全球,可引起多种症状,包括:肺炎、支气管炎、上呼吸道疾病,有时并不表现出症状,通常与其他细菌或病毒难以区分。肺炎支原体经常在患呼吸道疾病的病人中被发现,并且还与多发性关节炎、中风、传染性神经元炎、冠状动脉疾病等有关。肺炎支原体是肺炎的重要致病因子,据报道,在大众群体中占所有获得性肺炎病例的10-30%,在封闭性群体(如住宿的学生、军人)中则占25-71%。

肺炎支原体体外培养时生长缓慢,有时需数周的时间,因此很少使用体外培养法检测。其他可能的检测方法包括:免疫印迹,免疫荧光染色,血细胞吸附试验,四唑还原,代谢抑制试验,血清学试验和聚合酶链式反应(PCR)等。由于成本低,测试时间相对较短,EIA血清学分析是最常用的肺炎支原体检测方法,其缺点在于需要使用活组织,这种取样方式可能会加大感染的严重程度。血清学方法通常特异性和灵敏度都比较低,且只能做回顾性检测。PCR是确定肺炎支原体存在的最快速和最有效的方法,有更高的灵敏度和更强的特异性,且检测时间短,仅需几个小时即可获得结果。定量PCR法与常规PCR法相比,不仅可以精确定量,而且操作更为方便,更少受环境污染的影响。

本试剂盒选择细胞黏附素基因作为靶点,特异性识别肺炎支原体,经BLAST验证,与其他生物基因组没有交叉反应。本试剂盒检测了分布范围类似的28种细菌和6种病毒,未发现非特异信号;对49个组织样品DNA进行检测,发现38个阳性,与常规PCR方法检测结果一致。

本试剂盒包含热启动DNA聚合酶、dNTP(以dUTP代替dTTP)、引物、探针、阳性对照品、ROX染料,和用以防止残余DNA污染的UDG(Uracil- DNA Glycosylase,尿嘧啶-DNA-糖基酶),用户只需准备好DNA样品即可使用。

本试剂盒采用的DNA聚合酶源自极端嗜热菌(Thermus thermophilus),经改造后较普通的Taq酶具有更强的抗抑制能力和热稳定性。通过结合特异性单克隆抗体,在室温下DNA聚合酶活性被抑制。在PCR循环的热变性阶段,抗体受热被去除,此时DNA聚合酶活性恢复,因此获得“热启动”功能。热启动可减少残余DNA的污染,提高PCR扩增效率、灵敏度和目的片段产量。


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