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【包邮】支原体污染PCR检测试剂盒

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商品参数

支原体污染PCR检测试剂盒

PCR Detection Kit for Mycoplasma Contamination

型号
规格
Myco-P-2020次反应
Myco-P-5050次反应
Myco-P-100100次反应


 保存条件:保存于-20℃,避免反复冻融。没有反复冻融的情况下,保质期一年。


产品文档:支原体去除实例.docx   支原体污染PCR检测试剂盒说明书.docx



商品说明

支原体污染PCR检测试剂盒,用于检测细胞培养中的支原体污染,可检测属于柔膜菌纲(Mollicutes)的支原体、脲原体、无胆甾支原体、螺原体、虫原体、中间原体等超过一百种,与柔膜菌纲以外的其他微生物没有特异性反应。支原体常被用作柔膜菌纲的统称。

支原体是一种直径约为0.1-0.3 μm、无细胞壁的原核生物,具有变形能力,可透过常见过滤膜(0.22-0.45 μm),因此常规的无菌过滤方法不能将其去除,靶向细胞壁的抗生素也对支原体无效。支原体种类繁多,通常为寄生性或腐生性,有些种类可作为正常共生菌存在,有些种类具有致病性,还有一些种类具有细胞侵入性。

支原体污染是基础研究和工业生产中一个很常见的问题,据报导,有5-35%的细胞株受到污染;一些实验室由于对此不够重视,实际上可能有高达80%以上的细胞株发生支原体污染。支原体在光学显微镜下不可见,对培养基的需求有限,一般不会引起培养物混浊,因此细胞被支原体污染一般难以察觉。支原体污染能消耗营养物,促进代谢积累,导致pH改变,诱导或抑制细胞因子表达,并改变培养细胞的代谢、增殖特征及形态。由于支原体污染能影响几乎每一个细胞参数,所以很多研究都强调常规检测正在培养的细胞,以确保观察到的结果不被支原体污染所损害。

目前已知的支原体种类约200种,污染细胞培养物的支原体种类有20多种。其中95%的污染是由五种支原体引起:精氨酸支原体(Mycoplasma arginini),发酵支原体(Mycoplasma fermentans),猪鼻支原体(Mycoplasma hyorhinis),口腔支原体(Mycoplasma orale)和莱氏无胆甾原体(Acholeplasma laidlawii)。精氨酸支原体和莱氏无胆甾原体为牛源性,主要由牛血清带入;猪鼻支原体主要由胰酶(通常来源于猪)带入;发酵支原体和口腔支原体为人源性,主要由实验操作人员带入,人源性的支原体污染还包括唾液支原体和人型支原体。原代细胞的支原体污染占比不到1%,但是种类最多,已知有17种支原体,主要为鼠、禽和犬来源的支原体,如鸡毒支原体(Mycoplasma gallisepticum)、关节炎支原体(Mycoplasma arthritidis)、肺支原体(Mycoplasma pulmonis)、犬支原体(Mycoplasma canis)等,一般是从原始的动物组织中带入进来,因此种类比较多,并且有不确定性。欧洲药典(EUROPEAN PHARMACOPOEIA)2.6.7指定了六种需检测的支原体:莱氏无胆甾原体,鸡毒支原体,猪鼻支原体,口腔支原体,肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae)和滑液支原体(Mycoplasma synoviae)。由上述内容可知,引起细胞污染的支原体种类较为繁杂,并且可能存在未知种类,因此使用支原体通用性PCR引物更适合检测支原体污染的需要,可以避免使用物种特异性引物可能导致的漏检情况。

目前美国、欧洲、日本的药典仍然推荐体外培养法作为检测支原体污染的金标准。培养法通过使用选择性培养基,可以达到很强的特异性,并且有很高的灵敏度,但是其缺点在于操作比较繁琐,且耗时较长,完成一个完整的检测需28天之久。对于大多数实验而言,这是一个不可承受的时间成本。PCR检测由于其特异性强、灵敏度高,且快速的特点,成为培养法的最优替代方案,正逐渐被世界各国所接受。

本试剂盒采用支原体通用性引物,可检测上述提及的全部支原体,最低检测极限(LOD,100%检出时的最低模板浓度)为反应液中10个支原体基因组,能在2到3小时内获得可靠的结果,是一种灵敏度高、特异性强、快速的检测支原体污染的方法,具有以下特点: ①特异性引物是针对高度保守的支原体16S rRNA序列设计的,可用于检测非常广泛的支原体种类,不受真核细胞或细菌DNA干扰。经本试剂盒测试的支原体菌株涵盖了所有常见的支原体污染种类; ②灵敏度极高,最低检测极限仅需10个拷贝的支原体基因组; ③阳性对照所用引物与支原体检测相同,可帮助判断假阴性现象,避免假阴性导致的误判; ④包含PCR反应所需的所有成分,只需进行一次PCR反应,降低了交叉污染的几率,使用方便。

由于支原体污染比较隐蔽,所以建议给细胞定期做支原体检测,以免在未察觉的情况下给您的实验造成影响。可供参考的做法是:在新细胞进入实验室时,以及细胞冻存入库前,都应该做一下支原体检测,平时每三个月常规检测一次。

如发现支原体污染,可用我公司的支原体清除剂http://www.biothrive.cn/products/18241498.html  进行清除。支原体清除剂采用双重杀菌机制,不易耐药。

本产品仅供科学研究使用。

 

我司可提供数十种支原体的种类鉴定和检测,欢迎咨询客服。

支原体名称宿主支原体名称宿主
肺炎支原体猪支原体
生殖支原体猪肺炎支原体
人型支原体猪滑液支原体
穿透支原体人絮状支原体
唾液支原体猪鼻支原体
解脲脲原体
羊附红细胞体(羊支原体)
微小脲原体无乳支原体
人类脲原体(通用)山羊支原体山羊肺炎亚种
鸡毒支原体结膜支原体
滑液支原体腐败支原体
火鸡支原体火鸡绵羊肺炎支原体
衣阿华支原体鸟类丝状支原体族(通用)羊,牛
肺支原体莱氏无胆甾原体牛,羊
关节炎支原体丝状支原体丝状亚种
爱德华支原体Mycolasma leachii
犬支原体牛支原体
猫血支原体牛生殖道支原体
Candidatus Mycoplasma haemominutum维容氏支原体
嗜血支原体(通用)哺乳动物血液差异脲原体



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支原体清除剂,货号:Myco-E-h,Myco-E-1,Myco-E-5,产品链接:http://www.biothrive.cn/products/18241498.html


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