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鸭源莱氏无胆甾原体感染的发现：分离与定殖潜力莱氏无胆甾原体（Acholeplasma laidlawii）是一种广泛分布于环境中的支原体（Mycoplasma）物种。它常被视为一种机会性病原体，能够引起动物和人类的呼吸道感染。迄今为止，仅有少数研究报告了禽类中的莱氏无胆甾原体感染。在本研究中，研究人员从呈现气囊病变的病鸭肺脏和气管中分离到一株莱氏无胆甾原体菌株。药敏试验结果显示，该分离株对泰万菌素（tylvalosin）、泰乐菌素（tylosin）和沃尼妙林（valnemulin）敏感，其最低抑菌浓度（MICs）相对较低。研究人员通过皮下接种无特定病原体（SPF）鸭评估了该分离株的致病性。实验期间未观察到临床症状。通过聚合酶链式反应（PCR）检测口腔和泄殖腔拭子以及组织样本。结果表明，在接种后5至21天（dpi）的拭子中均可检测到该病原体，并且所有感染鸭的气管和肺脏样本均为阳性。肺脏和气管的组织病理学检查显示两种组织均出现病理变化。综上所述，这些发现表明莱氏无胆甾原体能够在鸭体内定殖并诱发轻微的组织病理学改变，提示该病原体可能对养鸭业构成流行病学风险。此外，这些结果表明莱氏无胆甾原体可定殖于鸭，强调需要进行持续监测以观察鸭群中新兴病原体的出现。 论文解读文章研究背景与目的随着中国养鸭业的快速扩张，疾病防控已成为制约产业发展的主要因素。近年来，许多病原体表现出跨物种传播的特性，例如坦布苏病毒（Tembusu virus）和鸭疫里默氏杆菌（Riemerella anatipestifer），这凸显了加强病原体传播监测的必要性。莱氏无胆甾原体（Acholeplasma laidlawii）是一种广泛分布于环境中的支原体（Mycoplasma）物种，通常被认为是机会性动物病原体。然而，截至目前，尚无其在鸭中感染的报道。本研究首次从病鸭中分离到一株莱氏无胆甾原体，并通过无特定病原体（SPF）鸭的实验感染证实其能在鸭体内建立定殖。这些发现表明莱氏无胆甾原体具备定殖鸭的能力，强调了建立适当的监测和控制措施以关注相关疾病出现的必要性。 研究方法研究人员从河北省出现呼吸道症状的病鸭养殖场采集肝脏、肺脏、气囊和气管等组织样本。采用VAMNE磁珠法病原DNA/RNA提取试剂盒提取总DNA/RNA，并使用针对禽流感病毒（AIV）、禽偏肺病毒（aMPV）、鸭腺病毒（DAdV）、鸭瘟病毒（DPV）、传染性支气管炎病毒（IBV）、鸭圆环病毒（DuCV）、柔膜菌纲（Mollicutes）和鸭疫里默氏杆菌（RA）的特异性引物进行聚合酶链式反应（PCR）或一步法反转录PCR（RT-PCR）检测。将组织匀浆接种于改良Frey液体培养基中进行支原体分离，并在固体培养基上进行纯化。通过16S rRNA基因测序鉴定分离株，并进行系统发育分析。采用微量肉汤稀释法测定多种抗菌药物对该分离株的最低抑菌浓度（MIC）。动物实验中，将20只1日龄SPF鸭随机分为两组，感染组每只皮下接种0.5 mL浓度为109 CCU/mL的莱氏无胆甾原体培养物，对照组接种等量无菌磷酸盐缓冲液（PBS）。在接种后不同时间点采集口腔和泄殖腔拭子进行PCR检测，并于21天后剖检，采集组织进行PCR检测和组织病理学检查。 研究结果3.1 从病鸭组织中检测到莱氏无胆甾原体 PCR检测结果显示，样本对AIV、aMPV、DAdV、DPV、IBV、DuCV和RA均为阴性，但对靶向柔膜菌纲的引物呈阳性。分离到的菌落在低倍显微镜下呈现典型的“煎蛋”形态，经16S rRNA基因测序鉴定为莱氏无胆甾原体，菌株命名为Duck.HeBei.M9.2025。 3.2 系统发育关系分析 基于16S rRNA序列构建的系统发育树显示，新分离的菌株Duck.Hebei.M9.2025与若干参考序列形成一个独特的分支，并与猪源菌株CP103951. Pig. China. (No. JS42.2021)和PG-8A (No. CP000896)等菌株进化关系较近，遗传相似性高。 3.3 最低抑菌浓度（MIC）测定 药敏试验结果显示，该分离株对沃尼妙林（valnemulin，MIC为0.0039 μg/mL）、泰万菌素（tylvalosin，MIC为0.0625 μg/mL）、泰乐菌素（tylosin，MIC为0.25 μg/mL）和替米考星（tilmicosin，MIC为0.5 μg/mL）表现出较低的MIC值；而对泰妙菌素（tiamulin，MIC为1 μg/mL）、多西环素（doxycycline，MIC为1 μg/mL）、金霉素（chlortetracycline，MIC为4 μg/mL）和恩诺沙星（enrofloxacin，MIC为8 μg/mL）则表现出相对较高的MIC值。 3.4 莱氏无胆甾原体菌株能以低致病性定殖于鸭 实验期间，所有鸭均未表现临床症状，剖检未见肺脏或气囊病变。PCR检测显示，从接种后5天至21天，感染鸭的口腔和泄殖腔拭子中均可检出该病原体。组织样本检测结果表明，所有感染鸭的气管和肺脏均为阳性，而肝脏和脾脏分别只有2只和1只鸭呈阳性，心脏和脑均为阴性。组织病理学检查发现，感染组鸭的气管出现支气管和毛细血管充血，伴有支气管和副支气管周围的局灶性淋巴细胞浸润；肺脏出现黏膜纤毛脱落、少量上皮细胞脱屑、固有层暴露以及杯状细胞数量减少。对照组鸭则未见异常。 讨论与结论讨论部分指出，莱氏无胆甾原体此前主要被认为是植物支原体病的病原体和细胞培养及疫苗的常见污染物，尽管早期研究显示其可感染多种哺乳动物和鹅，但在鸭中的感染报道极少。本研究中分离到的菌株对泰万菌素、泰乐菌素和沃尼妙林等药物敏感，为临床用药提供了依据。然而，皮下接种最高剂量的实验未能复制出临床病例中的严重症状，仅观察到轻微的组织病理学变化，这表明莱氏无胆甾原体虽能定殖于鸭，但单独感染时致病性较低。因此，研究人员推测其感染可能作为一种诱因，受到应激、营养、环境特别是共感染病原体的影响。尽管如此，回传实验证实呼吸道是其在鸭体内的易感器官系统，且感染鸭可通过口腔和泄殖腔排毒，提示空气传播可能是农场环境中的主要传播途径。 研究结论：从呈现气囊病变的病鸭中分离到了莱氏无胆甾原体菌株。动物回传实验证明，莱氏无胆甾原体能够定殖于鸭的肺脏和气管；然而，仅感染此菌株的鸭并未出现与田间病例相当的临床症状。这些发现表明莱氏无胆甾原体可在鸭体内定殖，需进一步监测以关注鸭群中病原体的变异情况。 |
