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【包邮】染料法嗜血支原体通用实时定量PCR试剂盒
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商品说明
染料法嗜血支原体通用实时定量PCR试剂盒 Dye-quantitative Real-time PCR Kit for Universal Hemoplasma
保存条件:保存于-20℃,避免反复冻融。没有反复冻融的情况下,保质期一年。 试剂盒特点: 1, 可作为嗜血支原体通用试剂盒使用,可检测绝大部分目前已知的嗜血支原体。 2, 使用热启动的Taq酶,可抑制非特异性扩增,降低背景荧光。 3, 带有阳性对照样品(组分C),可用于检验试剂盒有效性,以及验证待测样品中是否含有PCR抑制剂。 4, 带有ROX参比染料,帮助校正加样误差和管间差异。 5, 带有UDG酶和dUTP,可降低残留DNA的污染。 6, 本试剂盒灵敏度高,可检出反应液中最少达1-10个基因组。 嗜血支原体(Hemotropic mycoplasmas,或hemoplasmas)寄生于多种哺乳动物血液中,附着于红细胞表面,无细胞壁,具多形性,可通过血液传播。嗜血支原体曾被命名为附红细胞体(Eperythrozoon)和血巴尔通体(Haemobartonella,或译为血巴通氏体) ,分类为立克次氏体属,现已重新归类为支原体属。临床上嗜血支原体可引发溶血性贫血症,其他症状还包括:厌食症、昏睡症、脱水、体重减轻、突然死亡等,有时表现为急性发作,也有很多动物感染后症状轻微或无症状。不同种动物感染的嗜血支原体有遗传相似性,提示有跨物种传播的可能性。目前已在猫、狗、猪、牛、羊、驼、鼠等动物中发现嗜血支原体,很多动物的血液支原体感染仍为未知状态。 嗜血支原体尚不能体外培养,一般采用PCR法在血液或组织样本中检测。常规PCR方法较为繁琐,耗时较长,较易产生非特异性扩增;探针法实时定量PCR具有更强的特异性,较少受到残留DNA的污染,较难识别未知物种;SYBR法实时定量PCR可兼具二者的优点,通过熔解曲线来区分不同的PCR产物,提高检测的特异性,相较探针法,又可在一定程度上识别未知物种。 本试剂盒采用SYBR染料法,根据嗜血支原体的16S rRNA基因序列,设计通用引物,可识别寄生于常见哺乳动物(如:猫、犬、猪、牛、羊、鼠等)的所有已知嗜血支原体。通过BLAST验证,本试剂盒与非嗜血支原体的其他物种无交叉反应,个别物种可能产生的非特异信号可通过Tm值轻易排除。使用本试剂盒对320个猫血样进行检测,获得139个阳性,其中包括猫的全部三种嗜血支原体。对扩增产物进行测序,证实为嗜血支原体特异性扩增。 本试剂盒可识别的嗜血支原体包括:Mycoplasma haemofelis、Candidatus Mycoplasma haemominutum、Candidatus Mycoplasma turicensis、Mycoplasma haemocanis、Candidatus Mycoplasma haematoparvum、Mycoplasma suis、Mycoplasma wenyonii、Candidatus Mycoplasma haemobos、Mycoplasma ovis、Mycoplasma haemomuris、Mycoplasma coccoides、Candidatus Mycoplasma haemolamae、Mycoplasma erythrodidelphis、Candidatus Mycoplasma kahanei等。 本试剂盒包含热启动Taq酶、dNTP(以UTP代替了TTP)、引物、阳性对照品、SYBR Green I染料、ROX染料,和用以防止残余DNA污染的UDG(尿嘧啶-N-糖苷酶),用户只需准备好DNA样品即可使用。 热启动Taq酶结合了特异性单克隆抗体的DNA聚合酶,在室温下聚合酶活性被抗体抑制。在PCR循环的变性阶段,抗体受热被去除,聚合酶活性恢复,因此获得“热启动”功能,可减少残余DNA的污染,提高PCR扩增效率、灵敏度和目的片段产量。 SYBR Green I可以与DNA双链的小沟结合,结合后在497nm激发光照射下产生520nm的发射光。未结合双链DNA的SYBR Green I基本不产生荧光。因此可以根据荧光值的大小判断溶液内DNA双链的多寡,用于实时检测PCR反应过程中产物的累积量。初始模板浓度越高,反应循环数越高,则双链DNA含量越高,荧光值也就越高。值得注意的是,SYBR Green I也可以结合非特异性PCR产物以及引物二聚体,此时产生的荧光与目标扩增产物无法区分。为了判断荧光信号是否来自目标扩增产物,可以绘制熔解曲线。通过逐步缓慢升温,使双链DNA解离为单链DNA,同时检测荧光值的变化,绘制曲线,根据荧光值观察DNA解链的温度。 UDG和dUTP可以阻止前次步骤残余DNA的扩增。dUTP可以确保扩增后的DNA中均含有尿嘧啶。UDG可从单链或双链DNA上去除尿嘧啶残基,从而阻止含有尿嘧啶的DNA作为下几轮PCR的模板。在PCR循环开始前的UDG孵育步骤,可以破坏带有尿嘧啶的PCR产物。经过该去除污染步骤后,UDG在正常的PCR循环过程中被高温灭活,对PCR反应没有影响。 ROX不参与PCR反应,在PCR反应过程中荧光没有变化,可以提供一条基线用于校正加样误差和管间差异,便于仪器自动分析报告荧光与内参ROX荧光的比值,使定量更准确。ROX染料的激发波长为584nm,发射波长为612nm。用ROX进行校正后可以使实验误差减小十倍左右。 相关产品: 嗜血支原体通用PCR检测试剂盒,货号:M-hemo-20,M-hemo-50,M-hemo-100,产品链接:http://www.biothrive.cn/products/20490198.html 探针法Candidatus Mycoplasma haemolamae实时定量PCR试剂盒,货号:Mqt-hla-20,Mqt-hla-50,Mqt-hla-100,产品链接:http://www.biothrive.cn/products/20888263.html 猪支原体PCR检测试剂盒,货号:M-suis-20,M-suis-50,M-suis-100,产品链接:http://www.biothrive.cn/products/20506441.html 染料法猪支原体实时定量PCR试剂盒,货号:Mqs-sui-20,Mqs-sui-50,Mqs-sui-100,产品链接:http://www.biothrive.cn/products/18263303.html 探针法Candidatus Mycoplasma haemobos实时定量PCR试剂盒,货号:Mqt-hbo-20,Mqt-hbo-50,Mqt-hbo-100,产品链接:http://www.biothrive.cn/products/20887783.html 羊附红细胞体PCR检测试剂盒,货号:M-ovis-20 ,M-ovis-50,M-ovis-100,产品链接:http://www.biothrive.cn/products/18238348.html 染料法羊支原体实时定量PCR试剂盒,货号:Mqs-ovi-20,Mqs-ovi-50,Mqs-ovi-100,产品链接:http://www.biothrive.cn/products/18263425.html 猫血支原体PCR检测试剂盒,货号:M-hfel-20,M-hfel-50,M-hfel-100,产品链接:http://www.biothrive.cn/products/20490433.html 染料法猫血支原体实时定量PCR试剂盒,货号:Mqs-hfe-20,Mqs-hfe-50,Mqs-hfe-100,产品链接:http://www.biothrive.cn/products/20866591.html 探针法猫血支原体实时定量PCR试剂盒,货号:Mqt-hfe-20,Mqt-hfe-50,Mqt-hfe-100,产品链接:http://www.biothrive.cn/products/20888094.html 染料法Candidatus Mycoplasma turicensis实时定量PCR试剂盒,货号:Mqs-tur-20,Mqs-tur-50,Mqs-tur-100,产品链接:http://www.biothrive.cn/products/18263249.html 探针法Candidatus Mycoplasma turicensis实时定量PCR试剂盒,货号:Mqt-tur-20,Mqt-tur-50,Mqt-tur-100,产品链接:http://www.biothrive.cn/products/20894474.html Candidatus Mycoplasma haemominutum PCR检测试剂盒,货号:M-hmin-20,M-hmin-50,M-hmin-100,产品链接:http://www.biothrive.cn/products/20599532.html 染料法Candidatus Mycoplasma haemominutum实时定量PCR试剂盒,货号:Mqs-hmi-20,Mqs-hmi-50,Mqs-hmi-100,产品链接:http://www.biothrive.cn/products/20878763.html 染料法Candidatus Mycoplasma haematoparvum实时定量PCR试剂盒,货号:Mqs-hpa-20,Mqs-hpa-50,Mqs-hpa-100,产品链接:http://www.biothrive.cn/products/18240950.html 探针法Candidatus Mycoplasma haematoparvum实时定量PCR试剂盒,货号:Mqt-hpa-20,Mqt-hpa-50,Mqt-hpa-100,产品链接:http://www.biothrive.cn/products/20891265.html 维容氏支原体PCR检测试剂盒,货号:M-weny-20,M-weny-50,M-weny-100,产品链接:http://www.biothrive.cn/products/20506380.html 探针法维容氏支原体实时定量PCR试剂盒,货号:Mqt-wen-20,Mqt-wen-50,产品链接:Mqt-wen-100,http://www.biothrive.cn/products/20894862.html 所有评价(0)
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