寄居宿主：城市森林片段中叶口蝠科（Phyllostomidae）蝙蝠的体外寄生虫与虫媒病原体（Vector-Borne Pathogens）

虽然蝙蝠已知携带多种病毒和细菌，但其作为血寄生虫（hemoparasite）宿主的作用尚未被广泛研究。本研究调查了巴西东南部一座城市森林片段中采集的74只叶口蝠科（Phyllostomidae）蝙蝠体外寄生虫及虫媒病原体——包括无形体科（Anaplasmataceae）病原体、血源性支原体（hemotropic Mycoplasma spp.）、顶复门原虫（apicomplexans）及动质体目（kinetoplastids）原虫——的感染情况。总体而言，31.1%的蝙蝠被检出携带体外寄生虫：82.6%仅感染蝠蝇科（Streblidae）蝙蝠蝇，13.0%仅感染螨类，4.4%为两者混合感染。吉姆萨（Giemsa）染色血涂片中未观察到血寄生虫。此外，所有样本针对梨形虫目（Piroplasmida）和疟原虫目（Haemosporida），以及无形体属（Anaplasma sp.）、新立克次体属（Neorickettsia sp.）、克氏锥虫（Trypanosoma cruzi）和伊氏锥虫（Trypanosoma evansi）的PCR检测均为阴性。分子分析显示，1.4%的蝙蝠埃里希氏体属（Ehrlichia sp.）阳性，20.3%血源性支原体（hemotropic Mycoplasma spp.）阳性，1.4%婴儿利什曼原虫（Leishmania infantum）阳性。阳性样本中发现1.4%存在混合感染。序列分析表明检出的埃里希氏体（Ehrlichia sp.）与犬埃里希氏体（Ehrlich ia canis）高度相近，检出的支原体（Mycoplasma sp.）与蝙蝠相关血源性支原体序列一致性较高。上述发现证实了所采样的叶口蝠科蝙蝠中存在体外寄生虫和血源性病原体，表明这些传染性因子在城市森林片段中循环。尽管蝙蝠在维持病原体生命周期中的具体作用尚待阐明，但本初步结果强调了扩大生态流行病学研究的必要性，突显了研究蝙蝠种群中此类病原体的重要意义，及其对公共卫生和生物多样性保护（如人畜共患溢出和种群应激）的潜在影响。

本研究发表于《Veterinary Research Communications》。目前蝙蝠作为多种新兴病毒的重要储存宿主已被广泛认知，但其作为血寄生虫（hemoparasite，指寄生于血液中的原虫、立克次体及支原体等）及虫媒病原体（vector-borne pathogens）野生动物宿主的生态流行病学角色研究仍较欠缺。叶口蝠科（Phyllostomidae）蝙蝠分布于新热带界，常栖息于受人类活动干扰的城市森林片段，与家养动物及人群接触机会增加，可能参与无形体科（Anaplasmataceae，含埃里希氏体Ehrlichia、无形体Anaplasma、新立克次体Neorickettsia）、血源性支原体（hemotropic Mycoplasma，旧称血巴通体hemotrophic Bartonella-like organisms但本文指Mycoplasma）、梨形虫目（Piroplasmida）、疟原虫目（Haemosporida）及动质体目（Kinetoplastida，含利什曼原虫Leishmania与锥虫Trypanosoma）等病原体的循环。研究人员旨在探明巴西贝洛奥里藏特（Belo Horizonte）市一座城市森林保护区内野生叶口蝠科蝙蝠体外寄生虫感染率及虫媒血源性病原体分子流行率，以评估蝙蝠在城郊生态环境中对人畜共患病传播的潜在暴露风险，弥补新热带界城市生境蝙蝠虫媒病原流行病学数据的不足。

研究人员自2022年10月至2023年12月于米纳斯吉拉斯联邦大学（UFMG）生态站（Esta??o Ecológica da UFMG, EECO）——一处114公顷的大西洋森林—塞拉多（Cerrado）交错带城市森林片段——每月布设雾网（mist net）诱捕蝙蝠，经形态学鉴定至种/属级，采集全血于滤纸及制备血涂片，收集体表体外寄生虫（蝠蝇Streblidae与螨类）并于70%乙醇或封片保存鉴定；提取蝙蝠全血基因组DNA后以哺乳动物甘油醛-3-磷酸脱氢酶（gapdh）基因巢式/常规PCR验证DNA质量，随后分别进行针对Anaplasma sp.（16S rRNA）、Ehrlichia sp.（16S rRNA及23S–5S ITS）、Neorickettsia sp.、hemotropic Mycoplasma spp.（16S rRNA及23S rRNA）、巴贝斯虫/泰勒虫等Piroplasmida（18S rRNA）、Haemosporida（线粒体cyt b）、Trypanosoma cruzi（卫星DNA/minicircle）、T. evansi（18S rRNA/ITS）及Leishmania spp.（ITS1 nPCR后HaeIII酶切RFLP分型）的多重PCR检测，阳性扩增子测序并与GenBank比对，选取代表性序列构建最大似然法（Maximum Likelihood, ML）系统发育树进行分子分型鉴定。

74只蝙蝠中23只（31.1%）检出体外寄生虫，其中19只（82.6%）仅感染蝠蝇（以Trichobius costalimai最常见，另见Paratrichobius longicrus、Megistopoda proxima等8种），3只（13.0%）仅感染螨类（Periglischrus iheringi与Macronyssus meridionalis），1只（4.4%）为蝠蝇与螨类混合感染。研究人员得出结论：叶口蝠体外寄生蚤蝇多样性高且具宿主特异性，螨类感染率低，未检出硬蜱。

74份吉姆萨染色血涂片×1000倍油镜下均未发现任何疑似血寄生虫（无形体、血巴通体、梨形虫、疟原虫或动质体）结构。研究人员得出结论：光学显微镜敏感性不足以检测低载量或无裂殖体期循环的血源病原，需依赖分子检测。

74只蝙蝠中1只大棕蝠（Artibeus lituratus，1.4%）16S rRNA基因PCR阳性判定为埃里希氏体属（Ehrlichia sp.），23S–5S ITS区PCR为阴性；测序（GenBank: PQ576760）与犬埃里希氏体（Ehrlichia canis，KC479022）相似度99.32%。Anaplasma sp.与Neorickettsia sp.全部阴性。研究人员得出结论：研究区域叶口蝠可感染近似E. canis的基因型的Ehrlichia sp.，但流行率低，未检出Anaplasma与Neorickettsia。

以16S rRNA基因cPCR检出15只（20.3%）血源性支原体（hemotropic Mycoplasma spp.）阳性，23S rRNA基因仅1只（1.4%）阳性；选送测序的16S rRNA序列（PQ619014–PQ619017）与已发表新热带界蝙蝠血源性支原体相似度98.10%–99.47%，23S rRNA序列（PV429979）与已发表Artibeus jamaicensis来源支原体相似度98.65%。研究人员得出结论：新热带界叶口蝠中血源性支原体感染率较高，序列特征支持其与新热带蝙蝠相关支原体分支共分化（codivergence），与旧世界毒株不同。

巢式PCR（nPCR）检出1只（1.4%）Leishmania sp.阳性，经ITS1-PCR-RFLP（HaeIII消化）鉴定为婴儿利什曼原虫（Leishmania infantum）。T. cruzi、T. evansi、Piroplasmida及Haemosporida全部阴性。研究人员得出结论：尽管流行率极低，城市森林片段中叶口蝠可暴露于L. infantum传播网络，提示城郊生境野生动物—媒介—人畜共患病交叉暴露风险。

1只蝙蝠（1.4%）同时检出L. infantum与hemotropic Mycoplasma spp.混合感染。研究人员得出结论：蝙蝠可存在多重虫媒病原混合感染，可能对宿主健康产生协同影响。

研究人员指出，城市森林片段增加了野生动物—家养动物—人类接触，是潜在人畜共患病溢出的热点区域。本研究首次在巴西东南部城市森林片段叶口蝠中检出与E. canis高度相似的Ehrlichia sp.及L. infantum核酸证据，并证实血源性支原体在本地区叶口蝠中普遍存在（20.3%）；体外寄生虫以蝠蝇为主（总寄生率31.1%），未检出硬蜱。Giemsa染色血涂片镜检均为阴性，说明亚临床或低载量感染需分子手段检测。L. infantum阳性提示蝙蝠可接触内脏利什曼病传播循环，但其作为储存宿主或单纯偶然暴露尚需进一步通过媒介带毒率、蝙蝠排泌物含虫检测及宿主动物比较研究确认。Ehrlichia序列近E. canis不同于巴西吸血蝠中常见E. minasensis基因型，提示城市生境可能存在多源病原输入。血源性支原体序列聚类于新热带蝙蝠分支，支持蝙蝠—血源性支原体共分化假说。局限性包括部分个体未能完成形态学种级鉴定、雾网采样偏向飞行活跃种及可能遗漏染病行为异常个体。综上所述，研究人员认为叶口蝠是城市森林片段虫媒病原体循环的潜在微生境与被动扩散者，其在病原体生活史中的确切生态学地位——是偶然宿主还是真正储存宿主——需结合临床血液学参数评估、媒介带毒率调查及更大样本多时间点纵向监测加以验证；本研究为今后新热带界城市生态系统蝙蝠源虫媒病人畜共患病监测预警提供了基础流行病学依据。